фон

Биологические макромолекулы: достижения в экспериментальных методах САКС

2023-09-10 10:00

Малоугловое рентгеновское рассеяние (МУРР) является одним из важных методов анализа структурных и структурных изменений биологических макромолекул в растворе. Малый уголРентгеновскийРассеяние обычно используется для исследования сворачивания, взаимодействия и гибкости белков, а также для изучения структуры макромолекулярных комплексов и их структурной реакции на изменения внешних условий. Пространственное разрешение САКС обычно составляет десятки ангстрем. По сравнению с другими методами определения характеристик (такими как макромолекулярная кристаллография, спектроскопия ядерного магнитного резонанса или криоэлектронная микроскопия), более низкое разрешение позволяет в основном получить форму и размер частиц. В современных устройствах синхротронного излучения выделенные линейные станции для рассеяния под малыми углами способны получать высококачественные данные за несколько миллисекунд, что делает возможным проведение экспериментов с временным разрешением в дополнение к обычным экспериментам.


Малоугловой рентгенэксперименты по рассеянию можно проводить в разбавленных растворах и обычно не требуют специальной подготовки проб. Для структурного исследования анализа формы раствор обычно должен быть высокоочищенным и монодисперсным, но не требует замораживания и кристаллизации. Таким образом, САКС очень удобен для высокопроизводительного скрининга анализов в различных условиях растворов. Информация, полученная с помощью САКС, также может дополнять другие методы структурной характеристики, поэтому она очень важна в комплексной серии характеристических тестов, которые часто позволяют получить исчерпывающую и точную информацию о макромолекулярных системах.

X-ray

В тесте САКС монохроматический, сильно коллимированный Рентгеновский лучрассеивается крупными молекулами, растворенными в растворителе после прохождения через образец. Эти молекулы обычно не имеют упорядоченного статического периодического расположения, как в кристаллах, а распределены в растворителе хаотично и направленно. Таким образом, рассеянные рентгеновские лучи будут создавать диффузный сигнал вблизи главного луча, а не резкий дифракционный сигнал, как в кристаллическом образце. Угловое распределение интенсивности рассеяния под малыми углами напрямую связано с глобальной структурой частиц, которую можно использовать для определения информации о структуре. Если образец представляет собой разбавленный раствор частиц в стандартных условиях, картина рассеяния является изотропной, т.е. азимут усредняется.

Small-angle X-ray

Малоугловый рассеянный сигнал, регистрируемыйдетекторсодержит не только рассеянный сигнал от макромолекулы, но также сигнал растворителя, устройства для образца и прибора САКС. Таким образом, вычитая рассеянный сигнал буферного раствора, то есть вычитая его из нормированной кривой интенсивности раствора образца, можно получить рассеянный сигнал от растворенных в растворителе биомакромолекул, обозначенный как I(s), из выражения рассеяниеРентгеновские лучичастицами и их гидратными оболочками. Интенсивность рассеяния выражается векторным уравнением s=4πsinθ/λ, где λ — длина волны падающего рентгеновского излучения, а 2θ — угол рассеяния.


Для разбавленных растворов (концентрации частиц обычно менее 1%) взаимодействие между частицами обычно отсутствует, поэтому различная интенсивность рассеяния (формфакторы) связана со строением самих частиц. Для высококонцентрированных растворов дополнительные межмолекулярные взаимодействия могут также отражаться в малоугловых рассеянных сигналах (называемых структурными факторами), которые в основном отражают взаимодействие частиц в разных местах. Вклад структурных факторов в рассеянный сигнал, обычно отражаемый в области малых углов кривой рассеяния, может быть использован для изучения взаимодействия между частицами. Но этот эффект необходимо устранить, если нужно изучить информацию о структуре частиц. В структурных исследованиях концентрация раствора обычно должна быть достаточно низкой, чтобы вклад структурного фактора был незначительным, но необходимо гарантировать определенную концентрацию, чтобы получить достаточно сильный рассеянный сигнал. Обычный подход заключается в проведении испытаний при различных концентрациях раствора образца, а затем экстраполяции на бесконечно разбавленные растворы.

Получить последнюю цену? Мы ответим как можно скорее (в течение 12 часов)
This field is required
This field is required
Required and valid email address
This field is required
This field is required